葵花籽油中16種鄰苯二甲酸酯的分析方法
方法來源：博納艾杰爾
摘要：本實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)了GB5009.271-2016食品中鄰苯二甲酸酯的國家標(biāo)準(zhǔn)，采用Cleanert PSA/Silica固相萃取柱結(jié)合氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的方法(GC/MS)對葵花籽油中16種鄰苯二甲酸酯進(jìn)行了測定。樣品經(jīng)乙腈提取，Cleanert PSA/Silica小柱凈化，GC/MS進(jìn)行檢測，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，當(dāng)加標(biāo)量為0.8 mg/kg時(shí)，回收率在70% ~ 115%之間，能夠滿足檢測要求。
關(guān)鍵詞：鄰苯二甲酸酯；Cleanert PSA/Silica；GC/MS
前言
鄰苯二甲酸酯，又稱酞酸酯，縮寫PAEs，是鄰苯二甲酸形成的酯的統(tǒng)稱。當(dāng)被用作塑料增塑劑時(shí)，一般指的是鄰苯二甲酸與4～15個(gè)碳的醇形成的酯。鄰苯二甲酸酯主要用于聚氯乙烯材料，令聚氯乙烯由硬塑膠變?yōu)橛袕椥缘乃苣z，起到增塑劑的作用。它被普遍應(yīng)用于玩具、食品包裝材料、醫(yī)用血袋和膠管、乙烯地板和壁紙、清潔劑、潤滑油、個(gè)人護(hù)理用品（如指甲油、頭發(fā)噴霧劑、香皂和洗發(fā)液）等數(shù)百種產(chǎn)品中，但對人體的健康有嚴(yán)重的危害。一般人容易會(huì)在塑膠制品包裝中接觸到鄰苯二甲酸酯類，在生活中有很多食物在加工、加熱、包裝、盛裝的過程里可能會(huì)造成鄰苯二甲酸酯的溶出且滲入食物中。含有鄰苯二甲酸酯的軟塑料玩具及兒童用品有可能被小孩放進(jìn)口中，如果放置的時(shí)間足夠長，就會(huì)導(dǎo)致鄰苯二甲酸酯的溶出量超過安全水平，會(huì)危害兒童的肝臟和腎臟，也可引起兒童性早熟。
本文通過重現(xiàn)國標(biāo)，建立了CleanertPSA/Silica固相萃取柱凈化葵花籽油中鄰苯二甲酸酯的前處理方法。
實(shí)驗(yàn)部分
儀器、試劑與材料
主要儀器設(shè)備
Agilent7890-5975C氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀
試劑材料
乙腈、丙酮為色譜純；正己烷、二氯甲烷均為農(nóng)殘級；
16種鄰苯二甲酸酯混合標(biāo)準(zhǔn)品（純度99%）：正己烷溶解；
Cleanert PSA/Silica：1g/6 mL。
樣品制備
樣品提取
稱取均勻的葵花籽油樣品0.5 g，加入100 μL正己烷，2 mL乙腈，渦旋1 min，超聲提取20 min，4000 r/min離心5 min，轉(zhuǎn)移上清液于另一干凈玻璃瓶中，殘?jiān)尤? mL乙腈，渦旋1 min，4000 r/min離心5 min，轉(zhuǎn)移上清液，殘?jiān)偌尤? mL乙腈提取一次。合并3次上清液，作為待凈化液。
樣品凈化
將Cleanert PSA/Silica小柱依次用5 mL二氯甲烷，5 mL乙腈活化，棄去流出液。將上述待凈化液上樣于Cleanert PSA/Silica小柱上，收集流出液，再用5 mL乙腈洗脫小柱，收集流出液。合并兩次流出液，加入1 mL丙酮，于40℃氮吹至近干，用正己烷定容至2 mL，渦旋混勻，供氣質(zhì)檢測。
基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液
取高濃度16種鄰苯二甲酸酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用空白樣品基質(zhì)溶液稀釋成0.2 μg/mL的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。
注：實(shí)驗(yàn)中應(yīng)避免使用塑料制品。
實(shí)驗(yàn)條件
色譜柱：DA-5MS色譜柱，30 m × 0.25 mm × 0.25 μm；
進(jìn)樣口溫度：260℃；柱溫：初始溫度60℃，保持1 min，以20℃/min 升至220℃，保持1 min，再以5℃/ min升至250℃保持1 min；再以20℃/min升溫至290℃，保持7.5min。
載氣：氦氣，純度≥99.999％
流速：1 mL/min；
電離方式：EI源。
離子源溫度：230℃；
溶劑延遲：7 min；
進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；
樣量：1 μL；
監(jiān)測方式：選擇離子掃描（SIM）。
表1. 16種鄰苯二甲酸酯監(jiān)測離子參數(shù)
| 物質(zhì)名稱 | 定性離子（m/z） | 定量離子（m/z） |
| 鄰苯二甲酸二甲酯DMP | 163，77，194，133 | 163 |
| 鄰苯二甲酸二乙酯DEP | 149,177,105,222 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二異丁酯DIBP | 149,223,104,167 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二正丁酯DBP | 149,223,205,104 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP | 59,149,104,176 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP | 149，167，85，251 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯DEEP | 72,149,104,193 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二戊酯DPP | 149,237,219,104 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二己酯DHXP | 149,251,104,233 | 149 |
| 鄰苯二甲酸丁基芐基酯BBP | 149，91，206，104 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯DBEP | 149，101，85，193 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二環(huán)己酯DCHP | 149,167,249,104 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯DEHP | 149,167,279,113 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二苯酯DPhP | 225，77，104，153 | 225 |
| 鄰苯二甲酸二正辛酯DNOP | 149,279,104,261 | 149 |
| 鄰苯二甲酸二壬酯DNP | 149,293,167,275 | 149 |
結(jié)果與討論
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
由表2可知，采用固相萃取結(jié)合GC/MS的方法檢測葵花籽油中的16種鄰苯二甲酸酯，加標(biāo)回收率在70% ~ 115%之間，能夠滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。由圖1、圖2、圖3可知，用DA-5MS色譜柱檢測16種鄰苯二甲酸酯，峰形良好且保留時(shí)間穩(wěn)定。
表2. 葵花籽油中16種鄰苯二甲酸酯加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果(添加水平0.8 mg/kg)
| 物質(zhì)名稱 | 保留時(shí)間/min | 平均回收率/% | 變異系數(shù)/% |
| 鄰苯二甲酸二甲酯DMP | 7.898 | 80.2 | 0.5 |
| 鄰苯二甲酸二乙酯DEP | 8.765 | 87.5 | 1.2 |
| 鄰苯二甲酸二異丁酯DIBP | 10.596 | 77.4 | 4.7 |
| 鄰苯二甲酸二正丁酯DBP | 11.401 | 78.6 | 4.3 |
| 鄰苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP | 11.717 | 81.6 | 9 |
| 鄰苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP | 12.452 | 88 | 4 |
| 鄰苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯DEEP | 12.85 | 86 | 3.4 |
| 鄰苯二甲酸二戊酯DPP | 13.298 | 92.5 | 3.2 |
| 鄰苯二甲酸二己酯DHXP | 15.564 | 110.7 | 3.8 |
| 鄰苯二甲酸丁基芐基酯BBP | 15.706 | 85.7 | 2.4 |
| 鄰苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯DBEP | 17.267 | 90.9 | 2.6 |
| 鄰苯二甲酸二環(huán)己酯DCHP | 17.889 | 97 | 1.2 |
| 鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯DEHP | 18.019 | 85.5 | 7 |
| 鄰苯二甲酸二苯酯DPhP | 18.152 | 101.8 | 1.4 |
| 鄰苯二甲酸二正辛酯DNOP | 19.711 | 83.4 | 1.9 |
| 鄰苯二甲酸二壬酯DNP | 20.171 | 84.5 | 3.3 |
圖1. 0.2 μg/mL16種鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)色譜圖
結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)GB5009.271-2016食品中鄰苯二甲酸酯測定的國家標(biāo)準(zhǔn)，用CleanertPSA/Silica小柱結(jié)合氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的方法對葵花籽油中的16種鄰苯二甲酸酯進(jìn)行了測定。對于加標(biāo)量為0.8mg/kg的樣品，加標(biāo)回收率在70%~ 115%之間，符合檢測要求，且變異系數(shù)小于10%，穩(wěn)定性良好。
附：相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)品
